Аналіз на каріотип

Каріотип (цитогенетичний аналіз) – це набір хромосом людини з повним описом усіх ознак (розмір, кількість, форма). Хромосоми є щільно упаковані нитки ДНК. Кількість і структура хромосом суворо специфічна кожного виду. У людини в ядрах соматичних (не статевих) клітин міститься у нормі 46 хромосом (23 пари). Одна з пар – статеві хромосоми – визначає стать людини. Жінка має дві X хромосоми, такий каріотип позначається як 46XX, у чоловіка є одна X і одна Y хромосома (каріотип 46XY). Нестатеві хромосоми називаються аутосомами.

Особливості аналізу на каріотип

• Каріотип не змінюється протягом життя, тому проводиться один раз у житті
• Дозволяє виявити причину репродуктивних проблем у подружніх пар
• Дозволяє підтвердити або поставити діагноз дитині з множинними вадами розвитку, або підозрою на хромосомну патологію
• Аналіз проводиться кандидатом наук, лікарем вищої категорії.

Зразки результатів на каріотип

Нормальний жіночий каріотип 46,XX та чоловічий каріотип з патологією - делецією Y-хромосоми.

Процес каріотипування

Каріотипування метефаз та прометафаз (400-750 сегментів на гаплоїдний набір), культивування на середовищі (PB-Max). Метод диференційного фарбування G-метод (CTG-техніка), а також як допоміжний для гетерохроматинових районів C-метод (CBG-техніка). Аналізуємо 20-100 метафазних пластин. Запис каріотипу згідно з ISN-2013. Хромосоми у звичайному стані клітини в ядрі не видно, їх стає видно під мікроскопом тільки на певних фазах поділу клітин. Для вивчення каріотипу використовують клітини в метафазі мітозу.

Для проведення дослідження каріотипу необхідно здати кров із вени. Кров культивують 72 години. Через кілька днів поділу культура обробляється спеціальною речовиною, яка зупиняє процес поділу клітин саме на стадії, коли видно хромосоми. З клітин культури готуються спеціальні препарати на склах, які будуть використані для дослідження. Для отримання додаткової інформації про структуру хромосом використовується спеціальне забарвлення (G-бендінг) в результаті якого кожна хромосома набуває специфічної поперечної смугастості. Тепер хромосоми повністю готові до аналізу.

Спеціаліст-генетик аналізує під мікроскопом 20-100 метафазних пластинок на предмет виявлення кількісних та структурних аберацій. До кількісних аберацій відносяться зміни числа хромосом. Наприклад, при синдромі Дауна є зайва 21 хромосома. Структурні аберації є зміною самих хромосом (інверсія - поворот ділянки хромосоми на 180 градусів, делеція - випадання ділянки хромосоми, транслокація - перенесення частини однієї хромосоми на іншу хромосому, тощо).

Аналіз дуже трудомісткий - на дослідження однієї людини іноді витрачається кілька робочих днів фахівця дуже високої кваліфікації.

Результати каріотипування інтерпретує лікар-генетик.

Запис каріотипу

Для систематизації цитогенетичних описів було розроблено Міжнародну цитогенетичну номенклатуру (International System for Cytogenetic Nomenclature, ISCN), засновану на диференціальному фарбуванні хромосом і дозволяє докладно описувати окремі хромосоми та його ділянки. Запис має такий формат:

• зазначається загальна кількість хромосом і набір статевих хромосом, між ними ставиться кома (46, XX; 46, XY);
• відзначається якась хромосома зайва або якої не вистачає (це вказується її номером 5, 6 та ін.); знаком "+" вказують на збільшення кількості хромосом, знаком "-" вказують на відсутність даної хромосоми (наприклад 47, XY, + 21)
• коротке плече хромосоми вказується символом (р); довге плече вказується символом (q);
• символи перебудов (транслокація позначається t, а делеція - del) поміщають перед номерами залучених хромосом, а перебудовні хромосоми укладають у дужки. Наприклад 46,XX,del(5)(p15.3)

Приклади запису каріотипу

• 46, XX - нормальний каріотип (жінка)
• 46, XY - нормальний каріотип (чоловік)
• 45, X - синдром Шерешевського-Тернера
• 47 XXY - синдром Клайнфельтера
• 47, XXX-трисомія по Х-хромосомі
• 47, XX, + 21 - синдром Дауна (жінка)
• 47, XY, + 18 - синдром Едвардса (чоловік)
• 47, XX, + 13 - синдром Патау (жінка)

Коли призначається дослідження?

Показання для каріотипування подружніх пар:

• чоловіча безплідність: важка олігозооспермія, необструктивна азооспермія, тератозооспермія;
• первинна аменорея;
• звичне невиношування вагітності в першому триместрі;
• наявність викиднів неясного генезу в анамнезі;
• випадки мертвонароджень в анамнезі;
• випадки ранньої дитячої смертності в анамнезі;
• народження дітей із хромосомною аномалією (наприклад, синдромом Дауна);
• народження дітей з множинними вродженими вадами розвитку (МВПР);
• планування ЕКЗ;
• невдалі спроби ЕКЗ;
• прогноз здоров'я майбутньої дитини.

Показання для каріотипування дітей:

• наявність вроджених вад розвитку;
• розумова відсталість;
• затримка психомоторного розвитку;
• затримка психомовного розвитку в поєднанні з мікроаномаліями;
• порушення або затримка статевого розвитку;
• затримка зростання;
• аномалії статі.

Підготовка до аналізу:

Вимоги здачі крові натще немає (легкий сніданок і незадовго до взяття крові випити 1-2 склянки звичайної негазованої води; дітей обов'язково напувати негазованою водою порціями, до 150-200 мл, протягом 30 хвилин), в день здачі крові не вживати медикаменти (включаючи вітаміни та БАД), напередодні виключити прийом смаженої та жирної їжі.

Наявність підвищеної температури тіла є протипоказанням до здачі крові на аналіз.

Приблизно за 2 тижні до здачі крові на аналіз каріотипування слід запобігти або відмовитися від впливу наступних факторів:

• наявність гострих захворювань або загострення хронічних;
• прийом лікарських препаратів: антибіотиків, гормональних та важких неврологічних препаратів;
• вживання алкоголю та куріння (мінімум за 32 години до здачі крові).