Підтверждення мутації по Сенгеру (1 мутація)

У медичній практиці можна досить часто зіткнутися з ситуацією, коли пацієнту потрібно провести підтвердне молекулярно-генетичне дослідження референсним, тобто методом, що уточнює. Це пов'язано з тим, що низка методик, що застосовуються сучасною медичною генетикою, наприклад, метод ДНК-мікрочіпів і секвенування нового покоління (NGS), можуть супроводжуватися невеликим відсотком помилок. Тому, при виявленні генотипу, що свідчить на користь постановки діагнозу, у таких випадках рекомендується підтвердження генотипу максимально точним методом. До таких методів, визнаних у всьому світі, належить так зване секвенування за Сенгер, тобто. буквене читання заданої ділянки ДНК довжиною 500-1000 нуклеотидів.

В основі цього методу секвенування лежить ферментативна побудова комплементарного ланцюга ДНК на одноланцюжковій матриці. При цьому в різних місцях ланцюга ДНК відбувається інгібування її подальшого зростання. Далі автоматичний секвенатор проводить розподіл отриманих фрагментів ДНК капілярним електрофорезом у розчині. Фрагменти ДНК, що виходять із капілярної колонки, реєструються детектором флуоресценції. Результати аналізують за допомогою програмного забезпечення. Вони представлені у вигляді послідовності різнокольорових піків, що відповідають чотирьом нуклеотидам. У подальшому співробітник лабораторії оформляє відповідний лабораторний висновок, в якому вказуються всі виявлені в ділянці ДНК, що цікавить, поліморфізми і мутації.

Показання для аналізу:

Як пройти дослідження

Матеріал для дослідження: Венозна кров з ЕДТА

Вимоги здачі крові натще немає (легкий сніданок і незадовго до взяття крові випити 1-2 склянки звичайної негазованої води; дітей обов'язково напувати негазованою водою порціями, до 150-200 мл, протягом 30 хвилин), в день здачі крові не вживати медикаменти (включаючи вітаміни та БАД), напередодні виключити прийом смаженої та жирної їжі, за 32 години виключити алкоголь.

У всіх випадках за результатами необхідно отримати консультацію лікаря-генетика.