Діагностика синдрому Прадера-Віллі методом FISH

FISH (флуоресцентна гібридизація in situ) — цитогенетичний метод, який дозволяє виявити мікроделеції в критичному регіоні 15q11–q13. При синдромі Прадера–Віллі він допомагає підтвердити наявність делеції на батьківській хромосомі 15 та візуалізувати її локалізацію.

Коли рекомендовано аналіз на синдром Прадера–Віллі FISH

• Є клінічні ознаки PWS (гіпотонія у новонароджених, слабке смоктання, затримка розвитку, гіперфагія/ожиріння, гіпогонадизм тощо).
• Потрібно підтвердити або уточнити мікроделецію 15q11–q13 після тесту метилювання або MLPA.
• Немає доступу до молекулярних методів метилювання (MS-PCR, MS-MLPA), потрібен первинний скринінг на делецію.
• Необхідна візуальна верифікація та оцінка розміру/мозаїцизму делеції.

Що визначає тест FISH при синдромі Прадера–Віллі

• Наявність мікроделеції в регіоні 15q11–q13 на батьківській хромосомі 15.
• Оцінка приблизного розміру делеції та її мозаїчного характеру (якщо присутній).

Обмеження методу FISH при синдромі Прадера–Віллі

• FISH не виявляє материнську уніпарентальну дисомію (UPD(15)).
• FISH не визначає дефекти імпринтинг-центру (IC defects).
• При негативному FISH і збереженій клінічній підозрі потрібен аналіз метилювання (MS-PCR/MS-MLPA) та/або дослідження STR-маркерів для виключення UPD.

Матеріал і підготовка до аналізу на синдром Прадера–Віллі

• Матеріал: венозна кров у пробірці з ЕДТА (фіолетова кришка).
• Спеціальної підготовки не потрібно.
• Для уточнювальної діагностики може знадобитися кров батьків (тріо).

Результати аналізу на синдром Прадера–Віллі

• Позитивний результат: виявлена делеція 15q11–q13 на батьківській хромосомі 15 — сумісно із синдромом Прадера–Віллі.
• Негативний результат: делеція не виявлена — для виключення PWS необхідний аналіз метилювання/UPD та оцінка імпринтингу.
• Звіт містить опис зонда, цільових локусів, кількість проаналізованих клітин та інтерпретацію результату.

Зразок висновку

Делецію не виявлено

Переваги методу FISH при аналізі синдрому Прадера–Віллі

• Пряма візуалізація цільового регіону на хромосомах.
• Можливість виявлення мозаїцизму та оцінки копійності в окремих клітинах.
• Швидкий результат за наявності типової клініки та високої ймовірності делеції.